EAEC多重PCR快速检测试剂盒

产品名称：EAEC多重PCR检测试剂盒
英文名称：MultiplexPCR Detection Kit for EAEC

注：EAEC表示肠道(dào)集聚性大肠埃希氏菌（機答Enteroaggregative Esch鐵討erichia coli）。

产品编号与包装规格：

产品简介：本试剂盒基于PCR技术，并适用于麗通食品中肠道(dào)集聚性大肠埃希氏菌的检测。

EAEC多重PCR检测试剂盒检测原理：利用4對(duì)特异性引物和PCR反应所需其他试剂，如反应著裡缓冲液、dNTPs以及Taq DNA聚合酶等，加入黃鄉待检核酸樣(yàng)品，即可進(jìn)行PCR扩增反应。經(jīng)哥街比對(duì)扩增产物目标条带组合即可判定所對(duì)应的致泻大肠埃希氏菌老綠类别。

产品特点：
   &n鐘朋bsp;  1. 快速简便：將工妹(jiāng)酶、引物等反应组分紙站混匀後(hòu)進(jìn)行干粉化处理，增加试剂稳定性，使用民森時(shí)减少溶液配制步骤，更为便捷，整个检测反应可在3 h内完成(c懂得héng)；
   &n電門bsp;  2. 特异性高：由GB 4789制唱.6−2016《食品微生物學(xué)检验致泻大肠埃希氏菌检验》提供的土線目标基因引物，保证扩增反应的高度森民特异性；
    &nbs坐場p; 3. 判读简单：扩增产物經(跳你jīng)琼脂糖凝胶电泳和紫外影電仪观察目标条带即可判别，直观方便。

储存条件与保质期：2~8℃条件下储存，有效期为1樂報2个月。

所需其他材料和适用仪器：
   &nbs師中p;  1. PCR仪、高速离心机、电泳仪、水平电泳槽訊化、紫外仪、移液器、移液枪头及离心管等；
  &nb紙劇sp;   2小行. 琼脂糖、溴化乙锭（EB）或其他核酸染畫議料。

EAEC多重PCR检测试剂盒产品组分：

EAEC多重PCR检测试剂盒使用指南：

1，樣(yàng)品前处理

   拍通1) 参照GB 4789.6−2016，使用1現飛 μL接種(zhǒng)环刮取营养琼脂平板或斜面(miàn)上鐘工培养18 h~24h的菌落，悬浮到(dào)含鐘爸30 μL裂解液的无菌离心管中，充分悬浮菌体，轻新司弹管壁消除气泡，99℃加热10 min；

   2) 12000 r/min离心體愛15 min，上清即为粗提的DNA，可转移至0.2 mL无菌离心管廠紙中，在-20℃下可長(cháng)期保存。

2，加樣(yàng)、反应

   1) 首-次使用時(sh飛道í)，分别加入80 μL超纯水至阳性對(著錢duì)照和阴性對(duì)照管中，充分溶解，-20℃存储待用；務家
   2)說們 取出冻干粉试剂EA1和EA2，按照需求分别剪取n个检测试剂中火管（n=待检测樣(yàng)品数+1管阳性對(duì)照+1管阴性對(du紅離ì)照），每管加入18 μL复溶液，充分溶解後(hòu)待用呢我；
   3) 向(xiàng)上述已加入复溶液腦弟的n个反应管中分别加入待测樣(yàng)品核酸、阴性對(厭師duì)照、阳性對(duì)照各2 μL，紧盖後(h藍那òu)置于PCR仪中按设定的反应光錯程序進(jìn)行扩增反应；
   4) PCR 窗頻反应程序如下：

3，结果判读：反应後(hòu)每管中加入4μL 6×loading buff高司er，混匀，并取8 μL樣(yàng東服)品經(jīng)1.5%琼脂糖凝胶电泳後(hòu)在紫外仪下國快观察，阴性對(duì)照仅有uid中什A条带扩增，阳性對(duì)照中出现目标条带（参照相影图1），PCR试验结果成(chéng)立。根据每个樣(yàng)大日品對(duì)应的冻干粉试剂EA1和EA2反应慢通产生的目标条带種(zhǒng)类，并查找该目标購在条带组合所對(duì)应的致泻大肠埃希氏菌类别（参照表1），即为检舞海测结果。若阴阳性對(duì)照管反应结果不符，则本次检测结果无效數跳，应重新检测或与产品技术支持联系。

EAEC多重PCR快速检测试剂盒适用于食品中肠道(dào)集聚性大肠埃希氏菌的定性检测。

EAEC多重PCR快速检测试剂盒适用于食品中肠道(dào)集聚性大肠埃希氏菌的定性检测。