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产品名称:EPEC-STEC-EHEC多重PCR检测试剂盒
英文名称:Multiplex PCR De開農tection Kit for PEC-STEC-EH議亮EC
注:EPEC 表示肠道(dào)致病性大肠埃希氏菌(Enteropath校購ogenic Escherichia coli);STEC 表你煙示产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shiga toxin-producing 如鐵Escherichia coli);EHEC 表示肠道(dào)出血性街時大肠埃希氏菌(Enterohemorrhagic Escheri讀船chia coli)。
产品编号与包装规格:
编号 | 规格 |
KJD02L | 24 测试/盒 |
产品简介:本试剂盒基于 PCR 技术,并适用于食品中 EPEC、STEC 和 EHE也睡C 的检测。
EPEC-STEC-EHEC多重PCR检测试剂盒检测原理:利用 5對(duì)特异性引物和 PCR反应所需其他试剂,如反应缓冲液、dNT飛南Ps以及Taq DNA聚合酶等,綠動加入待检核酸樣(yàng)品,即可進(jìn)行 PCR 扩增反应。經(jī區刀ng)比對(duì)扩增产物目标条带组合即可判定所對(duì)应的致泻大歌麗肠埃希氏菌类别。
产品特点:
&nb低影sp; 1. 快速简便:將(jiāng)酶、引物等反应组分混匀空在後(hòu)進(jìn)行干粉化处理,增加试剂稳定性,使用時(shí)用舊减少溶液配制步骤,更为便捷,整个检测反应可在 3 h 内完成(c火些héng);
&nbs個他p;2. 特异性高:由 GB 4789.6−2016《食品微數銀生物學(xué)检验致泻大肠埃希氏菌检验電了》提供的目标基因引物,保证扩增反应的高度特异性;
&nbs友秒p;3. 判读简单:扩增产物經(jīng)琼脂糖凝胶电泳和紫外仪观察去鐘目标条带即可判别,直观方便。
储存条件与保质期:2~8℃条件下储存,有效期为12个月。
所需其他材料和适用仪器:
&低線nbsp; 1. PCR 仪器、高速离心机、电通花泳仪、水平电泳槽、紫外仪、移液器、移液枪头又動及离心管等;
&nbs視市p;2. 琼脂糖、溴化乙锭(EB)或其他核酸染料。
EPEC-STEC-EHEC多重PCR舊樂检测试剂盒产品组分:
编号 | 组分名称 | 规格 × 数量 |
-- | 干粉试剂 EP | 8管 × 3排 |
-- | 干粉试剂 ST | 8管 × 3排 |
-- | PCR 复溶液 | 1mL × 1管 |
Y02 | 阳性對(duì)照 | 1管(冻干型) |
-- | 阴性對(duì)照 | 1管(冻干型) |
-- | 裂解液 | 1mL × 1管 |
-- | 超纯水 | 1mL × 1管 |
-- | 6 × Loading buf朋海fer | 240μL × 1管 |
說(shuō)明书 | 1份 |
EPEC-STEC-EHEC多重PCR检测试剂盒使用指南:
1,樣(yàng)品前处理
1) 参照 GB 4作不789.6−2016,使用 1 μL拍妹 接種(zhǒng)环刮取营养琼脂平板或斜面(miàn)上培兵機养18 h~24h 的菌落,悬浮到(dào)含 30 μL 裂解液的機雜无菌离心管中,充分悬浮菌体,轻弹管壁消除气泡,99℃加热 10 min;
2) 1日微2000 r/min 离心 15著弟 min,上清即为粗提的 DNA,可转移至 0.2 mL 无菌离心管中,樂你在-20℃下可長(cháng)期保存。明照
2,加樣(yàng)、反应
1) 首-次使用時(shí),分别加入 8用火0 μL 超纯水至阳性對(duì)照和阴性對(duì)照管中靜理,充分溶解,-20℃存储待用;
2) 取出冻干粉试剂 E秒影P 和 ST,按照需求分别剪取 n 个检测试剂管(n=待检测樣(yàng)品錢月数+1 管阳性對(duì)照+1 管阴性對(duì)照),每管加入 1暗得8 μL 复溶液,充分溶解後(hòu)待用;
3) 湖窗向(xiàng)上述已加入复溶液的 n 个反应管中分别加女離入待测樣(yàng)品核酸、阴性對(duì)照化上、阳性對(duì)照各 2 μL間下,紧盖後(hòu)置于 PCR 短女仪中按设定的反应程序進(jìn)離妹行扩增反应;
4) 這音PCR 反应程序如下:
3,结果判读:反应後(hòu)每管中加入 4μL 6×L個跳oading buffer,混匀,并取 8 μ舊兵L 樣(yàng)品經(jīng都黃) 1.5%琼脂糖凝胶电泳後(村歌hòu)在紫外仪下观察,阴性對(du樹綠ì)照仅有 uidA 条带扩增,阳性對(duì)照中出现書錯目标条带(参照图 1),PCR 试验结果成秒門(chéng)立。根据每个樣(yàng)品對(du頻土ì)应的冻干粉试剂EP 和 ST 反应产生的目标条带種視民(zhǒng)类,并查找该目标条带组合所對(男空duì)应的致泻大肠埃希氏菌类别(参照表 1),音來即为检测结果。若阴阳性對(duì為見)照管反应结果不符,则本次检测结果无效,应重鐘在新检测或与产品技术支持联系。
EPEC-STEC-EHEC多兒門重PCR检测试剂盒用于食品中肠道從件(dào)致病菌性大肠埃希氏菌、产志贺毒素大肠埃希氏菌、肠道(dào)出血性舞報大肠埃希氏菌的定性检测。
EPEC-STEC-EHEC多重PCR检测试剂盒用于食品中肠道(dào)致病業電菌性大肠埃希氏菌、产志贺毒素大肠埃希氏菌、肠道(dào)出血時電性大肠埃希氏菌的定性检测。