创伤弧菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)

产品名称：创伤弧菌核酸快速检测试剂好弟盒
英文名称：Rapid Detection kit for v路日ibrio vulnificus

产品编号与包装规格：

产品简介：本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术（Loop-mediated iso弟相thermal amplification，L舞一AMP），用于创伤弧菌的快速检测，可借助显色指示剂朋視直接判读结果。

检测原理：利用兩(liǎng)對(duì)特殊引物和具有链樂音置换活性的Bst DNA聚合酶，使模板兩(liǎng師快)端引物结合处循环出现环状单链结构，引物顺答鐵利与模板结合并進(jìn)行链置换扩增反应，实现在恒温条件下男銀（60-65℃）進(jìn)行连续快速扩增。反应加入歌唱显色指示剂，阴阳性结果显色差异显著，可直接通過(gu還有ò)颜色变化判读结果。

产品特点：
  &nbs中金p;   1. 快習腦速简便：將(jiāng)酶、引物等反应组分混匀後(hò時理u)進(jìn)行干粉化处理，增加试剂稳定性，使用時(shí)她們减少溶液配制步骤，更为便捷，整个检裡暗测反应可在1 h内完成(chéng)；
   &nbs她如p;  2. 特异性高：利用靶基因序列上的多對車个独立区域设计多条引物，保证扩增反应的高度特异性；
      通海3. 灵敏度高：最-低检验限达到(dào)18 CFU/Test；理跳
     &計術nbsp;4. 判读简单：反应前加入显色指示剂，反应中子後(hòu)通過(guò)肉眼观察反应液颜色变化或城和者經(jīng)荧光监测仪器跟踪荧光图谱的得有变化判读结果，直观方便，且可有效避免反应後(hòu)開(kāi)盖造成(c書可héng)的气溶胶污染。

创伤弧菌核酸快速检测试剂盒产品组分：

储存条件与保质期：2~8℃条件下储存，有效期为12个月。

适用仪器：
      1.藍筆 PCR仪器或金属浴恒温器，如果检测樣(yàng)品为D算和NA樣(yàng)品，水浴锅即可。
     &nbs她男p;2. 高速离心机，樣(yàng)品的舊物前处理需要用高速离心机做分离。

樣(yàng)品富集：
      1.要舊 樣(yàng)品前处理：参照《SN_T_2754_13-2011_議信出口食品中致病菌环介导恒温扩增(LAMP)检测方法_第12部分：创伤弧朋開菌》或各实验室自行建立或参考的前处理方法。
      2城是. 适用樣(yàng)品类型：增菌液或不舊者可疑菌落樣(yàng)品。
   &科玩nbsp;  3. 待测樣(yàng呢文)品存放：粗提的待检DNA樣(yàng)品保存于-4~0℃，存放時(河船shí)间不应该超過(guò)24 光日h；利用试剂盒提取的DNA樣(yàng)品可在-20℃長(chán水都g)期保存，但应避免反复冻融。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒操作流程

创伤弧菌核酸快速检测试剂盒使用指南：

1，樣(yàng)品前处理

   A. 商去樣(yàng)品增菌液模板DNA的制厭是备：
    &服腦nbsp;    書懂a) 吸增菌液1 mL到(dào)1.5 mL规格的无菌离心管中，60拍科00 r/min离心5 min，弃上清，50 μL无菌超生呢纯水悬浮洗涤沉淀1-2次，6000 r/min离心5 min，完-全去除上都志清；
  &nb紙志sp;     &nb資志sp;b) 加入30 μL裂解液，充分悬浮菌体，轻弹管壁消除气泡計輛，99℃加热10 min；
     &nb音高sp;  &nbs音生p;c) 12000 r/min离心站生15 min，上清即为粗提的DNA，可转移至0.2 mL无菌离心管中，在-2朋麗0℃下可長(cháng)期保存。

   B. 可疑菌落模板 窗的DNA 的制备：挑取可疑菌落，悬浮到(d畫鐵ào)含30 μL裂解液的无菌离心管中白這，後(hòu)按照上述步骤b)、c)操作些商。

2，阴、阳性對(duì)照和干粉试呢煙剂复溶

   高資;A. 阴、阳性對(duì)照复溶：首-次音話使用時(shí)，加入80 μL超纯水至阳性對(duì)照和阴熱區性對(duì)照冻干粉中，待溶解後(hòu)混匀，-20℃存储待用。
   B. 干粉放呢试剂复溶：取出冻干粉试剂，按照需求海年剪取n个检测试剂管（n=待检测樣(yàng)品数+1管阳性對男車(duì)照+1管阴性對(duì)照費北），每管加入20 μL复溶液，完-全溶解後(hò商有u)待用。

3，扩增反应
   A. 打開(kāi)能(分鐘néng)够提供恒温条件的仪器，设置到(d姐錯ào)63℃待用；
   B. 向(xiàng)上述已加入复姐嗎溶液的n个反应管中各加入显色指示剂2.請下5 μL；
   C. 向(xiàng)上述已加入复聽跳溶液的n个反应管中分别加入待测樣(yàng)品核酸、阴性對(duì)照雪冷、阳性對(duì)照各2.5 μL，器窗盖紧盖子；
   D. 將(jiāng)所慢作有的反应管置于恒温仪器中，恒温63℃反应50 min。

4，结果判读：反应结束後(hòu)，建议在自然光线充足的环境条就要件下，將(jiāng)樣(yàng)品置于白色背景下費著观察结果，阴性對(duì)照检测试剂管呈淡橙色，阳性對(du商和ì)照检测试剂管呈荧光绿，待测樣(yàng)品反应管以此作为對(大南duì)照進(jìn)行判读，若阴阳對(du又從ì)照反应管任一结果与上述情况不符，则本次检测结果无照紅效，应重新检测或与产品技术支持联系。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒灵敏度對(duì)比

创伤弧菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于创伤弧菌的快速检测，可借助显色裡車指示剂直接判读结果。

创伤弧菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于创伤弧菌的快速检测，可借助显色指示的亮剂直接判读结果。