溶藻弧菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)

产品名称：溶藻弧菌核酸快速检测试剂盒
英文名称：Rapid Detection kit計開 forVibrio alginolyticus

产品编号与包装规格：

产品简介：本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术（Loop-m南化ediated isothermal ampli什化fication，LAMP），用于溶藻弧菌的快速检测，可借助显色指們藍示剂直接判读结果。

检测原理：利用兩(liǎng)對(duì)特殊引物和具有链很唱置换活性的Bst DNA聚合酶，使模板兩(liǎng)端術綠引物结合处循环出现环状单链结构，引物顺利与模板结合并進(坐煙jìn)行链置换扩增反应，实现在恒温条件下（60-6火門5℃）進(jìn)行连续快速扩增。外去反应加入显色指示剂，阴阳性结果显色差异显著，可直接通過(guò)颜色变化判读東高结果。

产品特点：
     &nbs科商p;1. 快速简便：將(jiāng)酶、引物等反应组分月路混匀後(hòu)進(jìn)行干粉化处理，增加试剂稳拍科定性，使用時(shí)减少溶液配制步骤，更为便捷，整个检测反应可在1 少務h内完成(chéng)；
     &nb黑廠sp;2. 特异性高：利用靶基因序列上的多个独立区域设计多条引土錢物，保证扩增反应的高度特异性；
    姐國  3. 灵敏度高：最-低检验限达到靜不(dào)10 CFU/Test；
   草個;   4. 判读简单：反应前加入显色指示紅從剂，反应後(hòu)通過(guò)肉眼观察反应液颜色变化或者經(jīn做放g)荧光监测仪器跟踪荧光图谱的变化判读结果，直器女观方便，且可有效避免反应後(hòu)開(kāi)盖造成(chéng)章在的气溶胶污染。

溶藻弧菌核酸快速检测试剂盒产品组分：

储存条件与保质期：2~8℃条件下储存，有效期为12个月。

适用仪器：
     &志她nbsp;1. PCR仪器或金属浴恒温器，去年如果检测樣(yàng)品为DNA樣(y做通àng)品，水浴锅即可。
    &nb慢體sp; 2. 高速离心机，樣(yàng時笑)品的前处理需要用高速离心机做分离。

樣(yàng)品富集：
    &nb亮數sp; 1. 樣(yàng)品前处理：参照《SN_T_2754黃了_12-2011_出口食品中致病菌环介导恒温扩增(LAMP人人)检测方法_第12部分：溶藻弧菌》或西樂各实验室自行建立或参考的前处理方法。
      坐國2. 适用樣(yàng)品类型：增菌液或者可疑菌落樣(yàng)門術品。
    &商計nbsp; 3. 待测樣(金風yàng)品存放：粗提的待检DNA樣(yàng)品保存于-4~0℃，存放時(s體舊hí)间不应该超過(guò)24 h；利用试場慢剂盒提取的DNA樣(yàng)品可在-20℃長(cháng)期保存，但应廠議避免反复冻融。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒操作流程

溶藻弧菌核酸快速检测试剂盒使用指南：

1，樣(yàng)品前处理

   A. 樣(yàng)品增菌液作著模板DNA的制备：
     &nbs機城p;   a) 吸增菌液1 mL妹慢到(dào)1.5 mL规格的无菌离心管中，6000 r/mi短懂n离心5 min，弃上清，50妹員 μL无菌超纯水悬浮洗涤沉淀1-2次，6000 r/min离心5 min鄉線，完-全去除上清；
     玩購;  &nbs笑會p; b) 加入30 μL裂解液，充分悬浮菌体，轻弹管間湖壁消除气泡，99℃加热10 min；
   &nb城新sp;    &nb學請sp;c) 12000 r/min离心15 m舊是in，上清即为粗提的DNA，可转移至0.2 mL无菌离心管中，在-20℃下可長電市(cháng)期保存。

   姐用;B. 可疑菌落模板 DNA 的制备：挑取可疑菌落，悬浮到(dà低錢o)含30 μL裂解液的无菌离服聽心管中，後(hòu)按照上述步骤b)、c)操作。

2，阴、阳性對(duì)照和干粉试剂复溶

   器務A. 阴、阳性對(duì)照复溶：首-次使用時(shí)，加入80 μL超纯動在水至阳性對(duì)照和阴性對(duì)照冻干粉中，待溶解後(hòu)混匀，-玩從20℃存储待用。
   B. 話街干粉试剂复溶：取出冻干粉试剂，按照需求剪對雨取n个检测试剂管（n=待检测樣(yàng)品数+1管阳性對(duì舞店)照+1管阴性對(duì)照），每管加入2資西0 μL复溶液，完-全溶解後(hòu)待用。

3，扩增反应
   A. 打開(kā雜自i)能(néng)够提供恒温条件的仪器，设置到(dào)65 ℃待用；舞計
   B. 向(xiàng吧師)上述已加入复溶液的n个反应管中各加入显色指示剂2.5 μL；
   C. 向(xiàn河笑g)上述已加入复溶液的n个反应管中分别加入待测樣歌玩(yàng)品核酸、阴性對(duì)照、阳性對(duì)照各2.5 μL，盖紧藍器盖子；
   D. 將(jiāng)所有的反应管唱女置于恒温仪器中，恒温65 ℃反应50 min。

4，结果判读：反应结束後(hòu)，建议在自然光线充足的环境聽亮条件下，將(jiāng)樣(yàng)品置于白色背說區景下观察结果，阴性對(duì)照检测试剂管呈淡橙色，阳性對(duì)照检测吃理试剂管呈荧光绿，待测樣(yàng)品反应管以此作为對(購長duì)照進(jìn)行判读，若阴阳鐘務對(duì)照反应管任一结果与上述情况不符，则本次检测结果无效通術，应重新检测或与产品技术支持联系。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒灵敏度對(duì)比

 溶藻弧菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于溶藻弧菌的快速检测，可借助显色指示剂直接判女藍读结果。

 溶藻弧菌核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于溶藻弧菌的快速检测，可借助显色指示剂直接判读结果。