大肠杆菌O157:H7核酸快速森身检测试剂盒

产品名称：大肠杆菌O157:H7核酸快速检测试剂盒
英文名称：Rapid Detection制看 kit for Escherichia coli O風好157:H7

产品编号与包装规格：

产品简介：本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术村友（Loop-mediated isothermal amplification很上，LAMP），用于食品中大肠杆菌O157:H7 的快速上讀检测，可借助显色指示剂直接判读结果。

检测原理：利用兩(liǎng)對(duì)特殊引姐金物和具有链置换活性的 Bst DNA 聚合酶，使模板兩什厭(liǎng)端引物结合处循环出现环状单链结高到构，引物顺利与模板结合并進(jìn)行森書链置换扩增反应，实现在恒温条件下（近司60-65℃）進(jìn)行连续快速就少扩增。反应加入显色指示剂，阴阳性结果显窗愛色差异显著，可直接通過(guò)颜色变化判读结果。

产品特点：
    能制;  1. 快速简便：將(jiāng)那行酶、引物等反应组分混匀後(hòu)進(jìn票煙)行干粉化处理，增加试剂稳定性，使來討用時(shí)减少溶液配制步骤，更为又資便捷，整个检测反应可在 1 h 内完成(chéng)；
    &nbs放舊p; 2. 特异性高：利用靶基因序列上的多个独立区域设计多条引低間物，保证扩增反应的高度特异性；
  &nb術人sp;   電坐3. 灵敏度高：最-低检验限达到(dào) 29 CFU/Te愛子st；
    &nbs司中p; 4. 判读简单：反应前加入显色冷哥指示剂，反应後(hòu)通過(guò)肉眼观察反应液颜色变化可黑或者經(jīng)荧光监测仪器跟踪荧光图谱西南的变化判读结果，直观方便，且可有效避免反应後(雪志hòu)開(kāi)盖造成(chéng)的气溶胶污染。

大肠杆菌O157:H7核酸快速检测试剂盒产品组分：

储存条件与保质期：2~8℃条件下储存，有效期为12个月。

适用仪器：
   &nb相為sp;  1. PCR仪器或金属浴恒温器鐘道，如果检测樣(yàng)品为DNA樣(yàng)品，水浴锅即可玩討。
   說視   2. 高速离心机，樣(yàn會校g)品的前处理需要用高速离心机做分离。

樣(yàng)品富集：
   大事;   1. 樣(yàng文可)品前处理：取 25 g 待检樣(yàng)品置于 225 mL 改件在良 EC肉汤中，前增菌 10-12 h，對(d購員uì)增菌液中的菌体富集用于LAMP 快媽內速检测。
      湖煙;2. 适用樣(yàng)品类型：增菌液或者可疑菌落樣(yàng)品。年習
      3紅司. 待测樣(yàng)品存放：粗提的動睡待检 DNA 樣(yàng)品保存于-4~0℃，不应该超過(司說guò) 24 h；利用试剂盒提懂家取的 DNA 樣(yàng)品可在-20就舊℃長(cháng)期保存，但应避免反复冻融。

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒操作流程

大肠杆菌O157:H7核酸快速检测试剂盒使用指南：

1，樣(yàng)品前处理

   A. 樣拿相(yàng)品增菌液模板DNA的制备：
     都友    a) 在检测食品中大肠杆北制菌 O157:H7 時(shí)，吸增菌液 1 mL鐵道到(dào) 1.5 mL 规格的无菌离心管中，6000 r/min 离心5 劇務min，弃上清，用50 μL无菌超纯國頻水悬浮洗涤沉淀1-2次，6000光資 r/min 离心 5 min，完-全去除上清；
   &nb輛她sp;     b) 快業加入 30 μL 裂解液，充分悬浮菌体，轻弹管壁消除气泡，99℃加热民做 10 min；
    &快西nbsp;  話我  c) 12000 r/min秒頻 离心 15 min，上清即为粗提的 DNA，鐘如可转移至 0.2 mL 无菌离心管中，在-20℃書近下可長(cháng)期保存。

   B. 可疑菌落模房得板 DNA 的制备：挑取可疑菌落，悬浮到(dào睡知)含 30 μL 裂解液的无菌离心管中，後(哥不hòu)按照上述步骤 b)、c)操作。

2，阴、阳性對(duì)照和干粉试剂复溶

  &nb木河sp;A. 阴、阳性對(duì)照复溶：妹拍首-次使用時(shí)，加入 80 μ呢少L 超纯水至阳性對(duì)照和阴性對(duì)音區照冻干粉中，待溶解後(hòu)混匀，-20℃存储待用。兵美
   B. 干粉計家试剂复溶：取出冻干粉试剂，按照需求剪取 n 个检测试剂管（n=待检测樣學不(yàng)品数+1 管阳性對(duì藍計)照+1 管阴性對(duì)照），每管加入 20 μL 复溶液，完-全溶解後開來(hòu)待用。

3，扩增反应
   A. 打頻要開(kāi)能(néng)够提供恒温条件的仪器，设置到(dào) 64廠內℃待用；
   B. 向(xiàng)上述已業木加入复溶液的 n 个反应管中各加入显色指示剂 2.5 μL；
   C店微. 向(xiàng)上述已加入复溶液的 n 个反应管中分别加數森入待测樣(yàng)品核酸、阴性對(duì)照、器哥阳性對(duì)照各 2.5 μL，盖紧盖子；
   D. 將(jiāng)所用音有的反应管置于恒温仪器中，反应 50 min。

4，结果判读：反应结束後(hòu)，建议在自然光线充足的环境条件下，將(jiāng)但著樣(yàng)品置于白色背景下观察结果，阴但動性對(duì)照检测试剂管呈淡橙色，阳性對(duì影長)照检测试剂管呈荧光绿，待测樣(yàng)品反应管以此作为對(duì)照進(j報樂ìn)行判读，若阴阳對(duì)照反应管任一结果与上述情男門况不符，则本次检测结果无效，应重新检测或与产品技术支持联系。媽信

恒温荧光法核酸快速检测试剂盒灵敏度對(duì)比

大肠杆菌O157:H7核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于食品中大肠杆菌O船爸157:H7的快速检测。

大肠杆菌O157:H7核酸快速检测试剂盒(恒温荧光法)用于食品中大肠杆菌O157:學北H7的快速检测。